當(dāng)破傷風(fēng)毒素通過(guò)破傷風(fēng)梭菌發(fā)酵制成時(shí)，傳統(tǒng)的鐵來(lái)源是一種稱為還原鐵粉的不溶性制劑，該材料通過(guò)形成FeO（2）（銹）從系統(tǒng)中除去氧。
  
  當(dāng)接種在缺乏動(dòng)物和乳制品且含有葡萄糖，大豆蛋白胨和無(wú)機(jī)鹽的新開(kāi)發(fā)的培養(yǎng)基中時(shí)，生長(zhǎng)和毒素產(chǎn)生很差而沒(méi)有減少的鐵粉。發(fā)現(xiàn)用于毒素生產(chǎn)的還原鐵粉的濃度為0.5g/l。濃度越高，生長(zhǎng)進(jìn)一步增加，但毒素產(chǎn)量下降。
  
  無(wú)機(jī)鐵源未能取代還原鐵粉用于生長(zhǎng)或毒素形成。最接近的鐵源是硫酸亞鐵銨。有機(jī)鐵來(lái)源檸檬酸鐵和葡萄糖酸亞鐵比無(wú)機(jī)化合物更有活性，但不能代替還原鐵粉。不溶性鐵源，例如鐵絲，鐵箔和活性炭，令人驚訝地具有活性。
  
  活性炭與可溶性鐵源如硫酸亞鐵，檸檬酸鐵和葡萄糖酸亞鐵的組合顯示出活性增加，并且葡萄糖酸亞鐵組合幾乎取代了還原鐵粉。因此，似乎傳統(tǒng)的鐵源，還原鐵粉，在支持破傷風(fēng)毒素形成中起雙重作用，即釋放可溶性鐵源并提供不溶性表面。